产品货号:
MT0015
中文名称:
cDNA第一链合成试剂盒
英文名称:
First cDNA Synthesis Kit(with gDNA Remover)
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系5×RT MasterMix进行RNA的反转录反应,使用时只需加入模板、引物和RNase Free H2O即可,大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。MasterMix中添加了dsDNase(热敏双链特异性核酸酶),该双链特异性核酸酶(又名gDNA Remover)可在反转录的过程中,直接降解去除RNA中残留的基因组DNA污染(可去除100ng基因组DNA),从而在定量PCR的检测中无需考虑基因组污染的干扰,设计的定量PCR引物也无需进行横跨外显子。该试剂盒尤其适用于定量PCR检测。
该预混体系包含点突变致RNase H活性缺失的反转录酶、dNTP、反应Buffer、gDNA去除试剂和RNase抑制剂。该试剂盒采用的反转录酶去除了RNase H活性,从而避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选,使得其热稳定性更强,可耐受55℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应,采用高温反转录可显著打开RNA二级结构,从而提高复杂RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量,从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链cDNA可广泛用于2nd Strand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。
本试剂盒可有效反转录mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA,但是本试剂盒不可反转录microRNA、病毒DNA/RNA样品。
- dsDNase有效去除基因组的污染,抑制了因基因组污染引起的非特异性扩增。
- 55℃进行反转录的MLV反转录酶,能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板。
- 高效便捷的反转录预混体系。
- 反转录引物为Random Primer和Oligo dT Primer预混的RT Primer Mix,可更好的合成样品中的各种cDNA。
组分 | 规格 |
5×RT MasterMix(with dsDNase) | 400μL |
20×Oligo dT(25)&Random Primer | 100μL |
RNase-Free H2O | 1mL×2 |
保存条件:-20℃,可保存2年,避免反复冻融。
- 按以下组分配制反转录反应液
成分 用量 Total RNA or Poly(A) RNA 0.1~2μg 5×RT MasterMix(with dsDNase) 4μL *20×Oligo dT(25)&Random Primer 1μL RNase-Free H2O Up to 20μL
*注:反转录引物可根据需要改用特异性引物。 - 根据实际情况反转录可选择快速程序或标准程序
- 快速程序
温度 时间 说明 37℃ 15~30min cDNA合成 85℃ 5min 失活MLV - 标准程序
温度 时间 说明 25℃ 10min 引物配对 55℃ 30~60min cDNA合成 85℃ 5min 失活MLV
注:通常在定量PCR实验中使用快速程序进行反转录(反转录效率>80%),在进行高GC含量、含复杂二级结构、长片段的模板转录时采用标准程序(反转录效率>100%)。 - 快速程序
相关搜索:cDNA第一链合成试剂盒,反转录试剂盒,第一链cDNA合成试剂盒,逆转录试剂盒,RT试剂盒,First cDNA Synthesis Kit(with gDNA Remover)